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你知道重組細胞因子的要求有哪些么

更新時間:2020-07-27瀏覽:2529次

  細胞因子是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質通過結合相應受體調節細胞生長、分化和效應,調控免疫應答。
 
  細胞因子(cytokine,CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質,具有調節固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長、APSC多能細胞以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。
 
  下面重組細胞因子要求:
 
  1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
 
  2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。
 
  3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。
 
  4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
 
  5. 內毒素:kinetic LAL法檢測內毒素。
 
  6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經過濾除菌處理。
 
  重組細胞因子的狀態:
 
  市場上主流的重組蛋白產品,多在不含載體蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的條件下,以低鹽的形式做凍干處理,因此微量(多以微克計量)的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層,所以建議在收到試劑后,務必于開蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的底部(此時能否見到白色沉淀均屬正常現象)。

 

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